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酷搏科技推出q900系列384孔高通量荧光定量PCR系统

   2023-08-04 966
核心提示:96孔荧光定量PCR仪已成为分子生物学实验室的必备工具,但对于基因表达分析、基因分型研究(SNP/CNV)、病原体检测、核酸药物开发
 96孔荧光定量PCR仪已成为分子生物学实验室的必备工具,但对于基因表达分析、基因分型研究(SNP/CNV)、病原体检测、核酸药物开发、测序文库定量、作物育种等细分领域,依然存在更高通量的荧光定量检测需求。

为此,酷搏科技于2023年夏天推出全新产品——Quantagene q900系列384孔荧光定量PCR系统,以更全面的功能、更快速的检测、更准确的定量结果助力用户更高效的实验室研究。

 

产品特点

一台优秀的荧光定量PCR仪,需要在运行快速、操作简便的基础上最大程度实现每个反应孔温度、光学性能的一致,从而得到准确的检测结果。

为了实现这一目标,q900的热循环系统设计了3组独立输出的Peltier模块,分别对加热模块的 3个区域独立控制,确保不同区域间的温度均一性。

 

反应体积5µl,全部384孔使用完全一致的反应溶液时Tm值的分布。图中Tm最大与最小值之差为0.18°C,Tm平均值为80.52°C。

另一方面,q900 采用独特的双重反射静态光学模组阵列技术。每个光学通道配置独立的长寿命 LED光源、滤光片组和CMOS相机,双重反射的设计在小体积的机身中延长光路,降低孔板中心和边缘的荧光信号差异。

 
左:在q900MX上使用四种探针(蓝色:FAM,绿色:HEX,黄色:ROX,红色:Cy5)分别进行7个浓度10个梯度稀释(n=6)的一步法四重RT-qPCR实验。右:双重反射静态光学模组阵列结构示意图。

性能展示

优秀的384孔整板Ct一致性

得益于均一的热循环系统和稳定的光学系统,q900可以轻松实现整板Ct标准差小于0.05,有效消除边缘效应,在任何孔位进行实验都可以获得相同的准确结果。

 
  实验一 实验二 实验三
仪器编号 1 2 3
Ct平均值 17.775 17.783 17.580
Ct 标准差 0.022 0.020 0.031
Ct CV 0.12% 0.11% 0.18%
使用三台不同的q900仪器进行384孔整板实验的扩增曲线图

大范围浓度精准定量

q900可以在100-1010拷贝/反应范围内进行定量检测,稳定均一的温控系统确保全浓度范围高效扩增,为文库定量、基因表达定量等应用提供更准确的数据结果。
 
仪器型号 q225 q900
扩增效率 100.1% 100.1%
R2 0.9996 0.9996

使用q225及q900进行连续2倍梯度稀释实验,反应体积5 μl,每一浓度三个平行反应。在Ct值为4-30的区间范围内,q900均可以进行准确定量,且结果与q225实验结果高度一致。

1-25μl反应体积均可适配

考虑到操作方便性,q900推荐反应体积为5-10μl。而对于样本或试剂较为珍贵的情况,在q900上使用低至1μl的反应体系,依然可以获得相同准确性的测试结果,配合拟合算法计算Ct值,使得相同反应体系在不同反应体积下可以获得完全一致的Ct结果。

 
反应体积 Ct平均值 Ct标准差
20μl 17.918 0.050
10μl 17.915 0.007
5μl 17.933 0.009
2μl 17.939 0.027
1μl 17.954 0.026
 
在一个384孔板内分别使用20 μ l,10μl,5μl,2μl和1μl五种不同反应体积(图中不同颜色对应不同体积),组分配比完全相同的反应溶液,每个体积6个平行反应时的归一化扩增曲线。
 
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